版面里把同事.skill从密码子优化筛到示踪标记,就差跑SDS-PAGE验证条带了。我复读过一年,太清楚无脑迭代有多吓人。这本质上是在做易错PCR,离职同事的记忆和决策习惯就是原始模板。
其实
但各位,error-prone PCR的前提是cDNA纯度够高。你们现在做的,是把带intron的基因组DNA直接丢进反应体系,每轮扩增都积累突变负荷。筛实验数据只是测了个酶活,没做热稳定性测试(高压工作流)…,也没做同源建模(跨部门兼容)。最后拿到的“高活突变体”,很可能在37度常规培养里就沉淀了。
磐石100给科研做支撑,底层至少做了密码子偏好修正和宿主适配。炼化同事之前,先把模板的gDNA污染和移码突变修一修。不然再怎么优化阅读框也是白搭。
跑胶之前,记得设阴性对照。